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耗材專區(qū) | 應(yīng)用EZsep™HLB固相萃取柱建立化妝品中丙酸氯倍他索的檢測(cè)方法

更新時(shí)間:2023-10-24       點(diǎn)擊次數(shù):1071

前言

丙酸氯倍他索是一種抗炎皮質(zhì)類固醇,屬于糖皮質(zhì)激素中的一種,具有較強(qiáng)的抗炎、抗瘙癢和毛細(xì)管收縮作用,因此很多三無(wú)化妝品可能會(huì)違規(guī)添加糖皮質(zhì)激素,使用初期由于強(qiáng)大的抗炎功能,使皮膚呈現(xiàn)出一種光滑潔白吹彈可破的狀態(tài),但長(zhǎng)時(shí)間使用,就開(kāi)始出現(xiàn)紅血絲、爆痘,皮膚敏感等問(wèn)題,繼續(xù)使用會(huì)使皮膚情況越來(lái)越糟糕,停用皮膚情況更糟糕,最終只能求醫(yī)慢慢來(lái)調(diào)整。

本文參照《GB/T 24800.2-2009 化妝品中四十一種糖皮質(zhì)激素的測(cè)定》,利用EZsep™HLB固相萃取柱(60mg/3mL,貨號(hào):PZ12602)對(duì)化妝品樣品進(jìn)行凈化,再通過(guò)高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè),建立了化妝品中丙酸氯倍他索的檢測(cè)方法,此方法的回收率及平行性良好,適合化妝品中丙酸氯倍他索的檢測(cè)。

1、實(shí)驗(yàn)過(guò)程

1.1 儀器與試劑  

SPE1000 全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng),北京萊伯泰科儀器股份有限公司;

4500質(zhì)譜系統(tǒng),SCIEX公司;

E.T.氮吹濃縮儀,貨號(hào):C020017,北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司;

EZsep™HLB固相萃取柱(60mg/3mL,貨號(hào):PZ12602),北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司;

離心機(jī),H1850,湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有限公司;

乙腈(色譜純),購(gòu)自賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司;

甲醇(色譜純),購(gòu)自賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司。

1.2 工作液配制

丙酸氯倍他索標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:100ug/mL,溶劑為甲醇,購(gòu)自壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心;

丙酸氯倍他索標(biāo)準(zhǔn)工作液:取100μL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于10mL的容量瓶中,用40%乙腈水溶液定容,得到濃度為1.0μg/mL的標(biāo)樣工作液;

移取1.0μg/mL的苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)工作液0.05、0.1、0.2、0.4、0.8mL,分別置于1mL容量瓶中,用40%乙腈水溶液定容至刻度,得到濃度為0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3 實(shí)驗(yàn)部分

1.3.1 樣品制備

準(zhǔn)確稱取化妝品樣品0.2g(精確至0.01g)于15mL塑料離心管中,加入3mL飽和氯化鈉溶液,渦旋混勻使樣品分散,準(zhǔn)確加入2mL乙腈,充分渦旋提取2min,5000r/min離心10min,吸出上層清液于50mL離心管中,下層氯化鈉溶液用2mL乙腈重復(fù)提取1次,合并2次乙腈提取液,在提取液中準(zhǔn)確加入40mL高純水,混勻,加入亞鐵氰化鉀溶液0.2mL,混勻,加入乙酸鋅溶液0.2mL,混勻,5000r/min離心10min,轉(zhuǎn)移出上清液待凈化。

1.3.2 固相萃取凈化

EZsep™HLB固相萃取柱(60mg/3mL,貨號(hào):PZ12602)依次用5mL甲醇、10mL水活化,取1.3.1待凈化液上樣,上樣結(jié)束后用6mL10%乙腈水溶液淋洗萃取柱,再用4mL甲醇洗脫萃取柱,收集全部洗脫液,然后于E.T.氮吹濃縮儀(貨號(hào):C020017)40℃下氮?dú)獯蹈桑瑴?zhǔn)確吸取4mL水渦旋復(fù)溶0.5min,過(guò)微孔濾膜后供LC-MS/MS測(cè)定。

1.3.3 LC-MS/MS儀器條件

色譜柱:Shim-pack Velox C18(2.7μm,2.1*100mm);

檢測(cè)方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM);

流動(dòng)相:A:0.1%乙酸水,B:0.1%乙酸乙腈(梯度洗脫程序見(jiàn)表1);

流速:0.3mL/min;

進(jìn)樣量:1μL。

表1 梯度洗脫程序

img1 

 

2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 

2.1 加標(biāo)回收率結(jié)果

表2 加標(biāo)回收率結(jié)果

img2 

 

2.2 加液色譜圖

img3 

 

圖1 標(biāo)液色譜圖

2.3 加標(biāo)樣品色譜圖

 

img4  

圖2 加標(biāo)樣品色譜圖

3、結(jié)論

本次實(shí)驗(yàn)展示了使用EZsep™HLB固相萃取柱(60mg/3mL,貨號(hào):PZ12602)對(duì)化妝品中丙酸氯倍他索進(jìn)行凈化,通過(guò)高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行測(cè)定,該方法的加標(biāo)回收率在77.8%~83.3%之間,RSD為2.6%,能夠滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。說(shuō)明EZsep™HLB固相萃取柱(60mg/3mL,貨號(hào):PZ12602)能很好的完成方法中的凈化工作,并且結(jié)果穩(wěn)定、可靠。

4、參考文獻(xiàn)

《GB/T 24800.2-2009 化妝品中四十一種糖皮質(zhì)激素的測(cè)定》

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